酪蛋白磷酸肽

酪蛋白磷酸肽

一、化学结构与理化性质

酪蛋白磷酸肽（casein phosphopepetides，CPP）又称酪蛋白钙肽，是以牛乳酪蛋白为原料，通过生物技术制得的具有生物活性的多肽。CPP分子由20～30个氨基酸残基组成，其中包括4～7个成簇存在的磷酸丝氨酰基。

CPP为乳白色粉末，水分含量低于10％，是一种富含磷酸丝氨酸的天然多肽，易溶于水。当CPP浓度达到10mg/L时，可有效阻止不溶性磷酸钙的产生。在pH4.5和pH7.0的条件下，CPP溶液经120℃高温处理15min，其功能仍能分别保持99％、97％和94％。高纯度CPP在酸性条件下，具有极佳的稳定性和透明度，不会产生沉淀。CPP在5℃和25℃均可保持2年，其防止钙沉淀的功能指标基本无变化。同时，用凝胶过滤色谱分析法测定了CPP的分子量分布及其平均分子量。测定结果表明，CPP的平均分子量为2862，磷酸多肽含量为12.6％。

二、主要来源与生产制备方法

主要来源  主要存在于牛乳酪蛋白中。

生产制备方法  目前的生产制备方法主要以牛乳酪蛋白为原料，用合适的酶进行水解，将酪蛋白中特定的肽键切断，再经过分离纯化，制成不同规格的CPP产品。CPP生产的基本工艺为：酪蛋白→酶解反应→酶失活→干燥→CPP成品由上述工艺所得产品CPP含量为12％～20％，若经分离纯化可得到含量更高的产品。

其他   还可通过生物发酵方法制备。

三、分析方法

GB  尚未查到有效资料。

AOAC  尚未查到有效资料。

其他  常用方法有定磷法、液相色谱-质谱联用法（LC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）、高效毛细管电泳法（HPCE）等。

四、生理功能及作用

促进钙吸收  20世纪50年代初，Mellander就证实了CPP在没有维生素D参与的情况下就可以促进钙的吸收，并首次从酪蛋白的胰蛋白水解产物中分离出磷酸肽，发现这些肽的钙盐在生理条件下具有非常好的溶解性，无论正常婴儿还是佝偻病患儿，对CPP形式的钙比对自然状态的钙都能更好地利用。此后，Reeve从酪蛋白的水解产物分离到CPP，并进行体外试验发现，CPP可以在中性和偏碱性条件下阻止钙的沉淀，从而促进了小肠对钙的吸收。据Sato等报道，当老鼠饲食中含有CPP或酪蛋白时，将会增加大腿组织中放射性标记的钙的含量。

促进铁的吸收  在体外模拟试验中，CPP能显著地延缓或阻止难溶性磷酸盐结晶的形成。在模拟小肠环境下（pH7.0，37℃），将20mmol/L Na3PO3液1ml，加入20mmol/L Ca2+和40μgβ-CPP的混合液0.25ml后，经0～24h后，其上清液中钙含量基本不变，而对照组却大幅度下降。在体外模拟小肠的环境下（pH7.0，37℃），CPP不但能阻止Ca2+的沉淀，也能阻止Fe2+的沉淀。在ca2+=2.5mmol/L和PO43-=10mmol/L的条件下，加入不同浓度的CPP，溶液中可溶性Ca2+和Fe2+都会随着CPP浓度的提高而增加，它们被胃和小肠所吸收的量也相应增加。因为由食物中摄入的Ca2+或Fe2+，在胃肠的酸性条件下，能处于良好的溶解状态，但在小肠中下部pH7～8的弱碱性条件下，就会形成不溶性的盐类沉淀，故无法被吸收。CPP的加入，大大减弱了不溶性盐类的形成，从而保证了Ca2+和Fe2+被吸收。另一方面，经大鼠试验发现，由于CPP的添加，ca2+向血中的移行量为对照组的20多倍，Fe2+向血中的移行量约为对照组10～20倍。

防龋齿的功能  CPP能提高钙、铁、锌、镁等元素的生物利用率，并具有预防龋齿的功能，可用于预防和治疗牙结石。CPP中的丝氨酸-丝氨酸-丝氨酸-谷氨酸-谷氨酸片段的肽，有抗龋齿功能，并称为抗龋齿CPP（anticariogenic casein phoshopeptides，ACPP），在ACPP中约含86％ACPP。ACPP能通过络合作用稳定非结晶磷酸钙，并使之集中在牙斑部位，充当Ca2+和PO43-的缓冲剂，从而防止牙细胞所产生的酸对釉质的脱矿质作用。Reyhold和Thwaits共同证明了CPP具有明显的防龋齿功能。所以，用ACPP制成的糖果，诱发龋齿的危险性大大降低。

其他  Nagai等报道，CPP能提高精子和卵细胞的受精率。CPP还能提高骨密度，预防骨质疏松。

五、安全性研究

人群资料  尚未查到有效安全评价资料。

代谢情况  尚未查到有效资料。

急性毒性  LD50≥15g/kg（大鼠，经口）[11]。

遗传毒性  致突变试验：小鼠精子畸变试验、Ames试验、微核试验，均为阴性。

亚慢性毒性  尚未查到有效资料。

慢性毒性与致癌性  尚未查到有效资料。

生殖与发育毒性  尚未查到有效资料。

其他  尚未查到有效资料。

六、常见使用方法与调查/推荐摄入量

1、常见使用方法

（1）食品  可添加于粮食及粮食制品，包括大米、面粉、淀粉制品等，最大使用量为1.6g/kg。婴幼儿配方食品、较大婴儿和幼儿配方食品、婴幼儿断奶期食品中的最大使用量为3.0g/kg。饮料类（包装饮用水除外）中的最大使用量为1.6g/kg。

（2）保健食品  在促进钙、铁吸收等营养强化保健食品中有应用。

（3）其他  尚未查到有效资料。

2、调查/推荐摄入量

（1）调查摄入量  尚未查到有效资料。

（2）推荐摄入量  尚未查到有效资料。

七、国际组织和各国政府评价、批准、认可情况

中国  批准其作为食品强化剂（钙吸收促进剂），可添加于米谷类和饮料类食品中。最大使用量为1.6g/kg。CPP也是保健食品的常用原料。

美国  l998年美国作为食品添加剂认为一般是安全的，GRAS：GRN000011。终产品可在150mg含量以下，或者2.14mg/kg以下。

含有40％～60％酪蛋白膦酸肽的Calcium Casein Peptome，RN977027，在1997年也得到批准。在胶体中使用水平为5％（w/w）。

欧盟  尚未查到有效资料。

澳/新  澳新食品标准局添加剂名单238号为CPP，并且可以用于健康食品原料。

八、注意事项和禁忌

不适宜人群  未见报道。

禁忌  未见报道。

与药物相互作用  未查见相关文献资料。

其他  未见报道。

九、小结

酪蛋白磷酸肽主要存在于牛乳酪蛋白中，是以牛乳酪蛋白为原料，通过酶解制得。CPP具有促钙、铁吸收，防龋齿等生理功能及作用，广泛应用于食品、保健食品。我国批准其作为营养强化剂（钙吸收促进剂），可添加于调制乳、婴儿配方食品等各类食品中。最大使用量为3.0g/kg。CPP也是保健食品的常见功能成分。

资料来自：杨月欣，李宁. 营养功能成分应用指南.北京：北京大学医学出版社，2011.